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发布时间:2022-04-13 22:30:46
***表达产物通常是蛋白质,但是非蛋白质编码***如转移RNA(tRNA)或小核RNA(snRNA)***的表达产物是功能性RNA。
所有已知的生命,无论是真核生物(包括多细胞生物)、原核生物(***和古***)或病毒,都利用***表达来合成生命的大分子。***表达可以通过对其中的几个步骤,包括转录,RNA剪接,翻译和翻译后修饰,进行调控来实现对***表达的调控。***调控赋予细胞对结构和功能的控制,***调控是细胞分化、形态发生以及任何生物的多功能性和适应性的基础。***调控也可以作为进化改变的底物,因为控制***表达的时间、位置和量可以对***在细胞或多细胞生物中的功能(作用)产生深远的影响。在遗传学中,***表达是***型产生表型的基本水平。存储在DNA中的遗传密码通过***表达得到“翻译”,并且***表达的特性产生生物体的表型。因此,***表达的调节对于生物体的发育至关重要。
PEG法
其基本原理是在二价阳离子(Mg2+、Ca2+等)存在的情况下,PEG能够有效地诱导DNA产生颗粒状沉淀,从而使细胞膜能够通过内吞噬作用吸收这种DNA颗粒。
1993年Golovkin等用PEG法将H89的原生质体与含有鼠二氢叶酸还原酶(DHFR)突变***(氨甲1喋呤抗性)的质粒共培养,此***插入了玉米Ds1转座子中。筛选得到的愈伤***,在不含激1素的培养基上再生长出植株。同年Omirulleh等用PEG法将外源***导入到了HE89的原生质体中,建立了植株再生的转化体系。
PEG法虽然转化效率较高,但必须以裸1露的原生质体为受体,而且还受到***型的限制。
脂质体法
是用带正电荷的脂质体作载体携带外源***,与带负电荷的细胞膜融合,把外源***导入细胞。用脂质体法转化原生质体,其毒性较电1击法和PEG法小,且适于运输大分子DNA穿过质膜。
Antonelli等(1990)用该法将***组DNA转入BMS玉米原生质体,获得转化了的再生愈伤***,转化率高达8%。
脂质体法的优点是转化受体为单个细胞,易于筛选,不易形成嵌合体,对于原生质体再生能力好的植物品种,是非常好的转化方法。
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