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发布时间:2022-03-20 02:26:44
位点特异性重组法
这类方法使用来源于噬菌体的重组酶,这类重组酶能够识别特异性序列位点(长度数十碱基对至数百碱基对)并引发含有该位点的序列之间的重组;在腺病毒骨架和穿梭质粒中添加重组酶能够识别的特异性位点,在细胞内表达对应的噬菌体重组酶或体外使用重组酶,介导骨架质粒和穿梭质粒之间的位点特异性重组,将目的***引入骨架质粒,形成带有重组腺病毒***组的腺病毒质粒;转染包装细胞,进行病毒载体拯救。该方法进一步简化了腺病毒质粒的制备过程,它的缺限是在腺病毒***组的某些部位不可避免的残留了重组酶特异性识别位点。
腺病毒的研究简史
腺病毒对啮齿类动物有致***能力,或能转化体外培养的啮齿类动物细胞。使细胞转化只需要腺病毒***组的一部分,这些***位于***组的左端,约占整个***组的7%~10%。尽管腺病毒分布很广,但对***不出现致***性。***细胞是一类允许细胞(permissive cell),即这类细胞允许感1染入1侵的病毒在细胞内copy增殖,***后细胞裂解died而释放出大量1子代病毒。在体外培养的多种***肿1瘤细胞中均未查出腺病毒颗粒,但在人的1号染色体上有adl2的整合位点,这意味着***细胞对于腺病毒也可能是非允许细胞,即这类细胞在病毒感1染后,病毒不能在细胞内copy增殖,但可整合在受感1染细胞的***组内。这些细胞被病毒转化,表型发生改变,且可在体外期地培养传代。
腺病毒防治原则
腺病毒的甲醛灭活疫1苗已被用于某些人群的预防,而且将来有被用人二倍体细胞培养的减毒活疫1苗所替代的可能。但因腺病毒对动物具有致***作用,人们对全病毒疫1苗的作用与安全性存有疑虑。此外加强游泳池和浴池水的消毒,可使水传播性结膜1炎爆发的***性降至***小,在作眼的检查时应严格无菌操作,对所用设备充分灭菌,也可控制流行性结膜1炎的发生。对腺病毒感1染的cure仍无有效medicine。
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