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目前，传统的获得多***转基yin植株的方法包括共转化，再转化W及杂交。但是运 些传统方法的缺点是共转化的两个或多个***的转化效率是不可控的，每个***在目标***组的插入位置也是不一样的，而***分离会导致不稳定的遗传后代。另外再转化W及杂 交都是耗时的过程。

而为了克服运些缺点，具有单个或者多个转录盒子的多***载体应运而生并成功 应用于多个研究，但是运些多***表达载体的应用没有得到广泛的推广应用。因为大部分 的方法需要亚克1隆W至于克1隆所耗时间拉长;没有标签或者报告***与目标***相连，运 样就导致蛋白或者***的鉴定比较困难；另外，某些方法如采用同尾酶构建多***载体的方法受限于可用的酶的数量不多运个问题。所W构建多***载体需要根据研究目的而设计。

folin―酚***法早先是由lowry确定了蛋白质浓度测定的基本步骤。以后在生***学领域得到广泛的应用。这个测定法的优点是灵敏度高，比双缩脲法灵敏得多，缺点是费时间较长，要准确控制操作时间，标准曲线也不是严格的直线形式，且专一性较差，干扰物质较多。对双缩脲反应发生干扰的离子，同样容易干扰lowry反应。而且对后者的影响还要大得多。酚类、柠檬酸、***铵、tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等均有干扰作用。浓度较低的尿素（0.5%），***纳（1%），NaNO浓度（1%），TCA（0.5%），乙醇（5%），***H10O（5%），CH3COCH3（0.5%）等溶液对显色无影响，但这些物质浓度高时，必须作校正曲线。含***铵的溶液，只须加浓碳酸钠―NaOH溶液，即可显色测定。若样品酸度较高，显色后会色浅，则必须提高碳酸钠―NaOH溶液的浓度1～2倍。



20世纪70年代以来，人们通过酶***染色法，利用胰蛋白酶对肥大细胞(MC)进行染色，发现MC能够被染色，说明MC中一定含有胰蛋白酶活性物质。1981年Schwartz等进一步纯化这种酶后发现，它是由MC释放的，其活性90%以上来自一种酶，故命名为类胰蛋白酶。Miller等在1989年克1隆了第yi种类胰蛋白酶cDNA，其后又有几种类胰蛋白酶被克1隆。类胰蛋白酶在cDNA和蛋白水平被分为三类：α、β、γ，其中β含量***高。每个类胰蛋白酶***均含有6个外显子和5个内含子，编码30个氨基酸的前导链和245个氨基酸的活性的部位。通过氨基酸序列推断，α-类胰蛋白酶和β-类胰蛋白酶有90%的同源性。其主要区别在于β-类胰蛋白酶的-3位和215位氨基酸分别为精氨酸和甘氨酸，而α-类胰蛋白酶则分别为谷氨酰胺和天冬氨酸，两者的结构区别决定了它们活性差异。



多个蛋白质可以一起，往往是通过结合在一起形成稳定的蛋白质复合物，折叠或螺旋构成一定的空间结构，从而发挥某一特定功能。合成多肽的细胞器是细胞质中糙面型内质网上的核糖体。蛋白质的不同在于其氨基酸的种类、数目、排列顺序和肽链空间结构的不同。食入的蛋白质在体内经过消化被水解成氨基酸被吸收后，合***体所需蛋白质，同时新的蛋白质又在不断代谢与分解，时刻处于动态平衡中。因此，食物蛋白质的质和量、各种氨基酸的比例，关系到***蛋白质合成的量，尤其是青少年的生长发育、孕产妇的优生优育、老年人的健康长寿，都与膳食中蛋白质的量有着密切的关系。蛋白质又分为完全蛋白质和不完全蛋白质。缺乏必需氨基酸或者含量很少的蛋白质称不完全蛋白质，如谷、麦类、玉米所含的蛋白质和动物皮骨中的明胶等。