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选择素elisa***盒的实验原理

选择素elisa***盒是一类异亲型结合、Ca2+依赖的细胞粘着分子，能与特异糖基识别并结合。主要参与白细胞与血管内皮细胞之间的识别与粘着。

实验原理：

将目标包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入品或标本，其中的目标连接于固相载体上的结合，然后加入微生***的目标，将未结合的生物素洗净后，加入HRP标记和亲和素，再次洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶1标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。

精密度：精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV（%）=SD/mean×100

批内差：取同批次选择素elisa***盒对低、中、高值定值样本进行定量检测，每份样本连续测定20次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。

批间差：选取3个不同批次的***盒分别对低、中、高值定值样本定量测定，每个样本使用同一***盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。

批内差： CV<10% Inter-批间差： CV<13%

经测定，***盒在X期内按推荐温度保存，其活性率小于5%。为减小外部因素对***盒前后检测值的影响，实验室的条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可人为误差。

选择素elisa***盒识别的配体都是一些寡糖基团，迄今为止发现的配体都是一些具有唾液酸化路易斯寡糖(s-Le，siaglyl-Lewis)或类似结构的分子。一种寡糖基团可以存在多种糖蛋白和糖脂分子上，并分布于多种细胞表面，因此选择素分子配体在体内分布较为广泛。

如何评价和选择支原体检测***盒

1. 灵敏度。

灵敏度常用支原体***组的拷贝数或支原体菌株的CFU表示。

2. 特异性和广谱性。

质量好的***盒应检测的支原体物种越多越多，并且特异性强，即只针对支原体，不针对其他***等微生物，没有交叉反应。

3. 稳定性。

冻干粉比液体***的稳定性高。

4. 样本类型及样本处理。

一款好的***盒，会标出它适合的样本类型，也会说明如何处理样本。要注意有的样本含有***PCR反应的物质，因此需要处理。

5. 对照品。

一个好的***盒，会带有阳性对照和内控对照。内控对照是用于监测PCR是否正常。如果样本含有***PCR的物质，则内控对照的条带会发生缺失。有严重支原体污染的样本由于样本中的支原体对内控对照产生了竞争性***，因此支原体条带越强，内控条带越弱

DNA提取***盒是根据氯化芐法构建的，能够从样本中提取***组DNA的***盒。氯化1苄具有能将含有纤维素等的细胞壁中的羟基苄基化，从而***细胞壁的特性。本制品利用了氯化1苄的这一特性，将植物样品***融解后，再使用Pipet Tip的尖1端将植物样品在Microtube壁上数次按压即可***细胞壁。本法与传统方法相比，省去了液氮研磨等烦琐步骤，有利于一次性处理大量样品。而且，本制品经过了改良，热处理时间只需15分钟，使用本制品从实验开始至水相回收只需30分钟时间。得到的***组DNA可以进行PCR扩增及限制酶处理等。

DNA提取***盒主要可以分为以下几大类：小量全血***组DNA提取***盒、中量全血***组DNA提取***盒、***/细胞***组DNA提取***盒、中量/大量***/细胞***组DNA提取***盒、全血/***/细胞***组DNA提取***盒、CTAB植物***DNA提取***盒、新型植物***组DNA提取***盒、酵母***组DNA提取***盒、M13噬菌体单链***组DNA提取***盒。