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总RNA的抽提方法:

目前常用的方法是用异硫qing酸胍苯1酚抽提法。

提取步骤:

先用液氮研磨材料，匀浆，加入Trizol***，进一步破碎细胞并溶解细胞成分。然后加入氯1仿抽提，离心，分离水相和有机相，收集含有RNA的水相，通过异丙1醇沉淀，获得比较纯的总RNA,用于下一步mRNA的纯化。也可将含有RNA样品的细胞破碎液通过硅胶膜纯化柱纯化。

RNA浓度和纯度判断:

OD260为1时相当于浓度为50 ug/mL;

OD260/0D280值在1.8~ 2.0之间，表示纯度较好;

0D260/OD280值低于1.8，样品有蛋白质或酚污染;

0D260/0D280值大于2.0，提取的RNA可能有降解;

电泳后如果rRNA大小完整，而且28S rRNA和18SrRNA亮度接近2:1、mRNA分布均匀，则认为RNA。

为什么用无水乙醇沉淀DNA

　　用无水乙醇沉淀DNA，这是实验中较常用的沉淀DNA的方法。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶， 乙醇与核酸不会起任何化学反应，对DNA很安全，因此是理想的沉淀剂。

　　DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在，当加入乙醇时，乙醇会夺去DNA周围的水分子，使DNA失水而易于聚合。一般实验中，是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混合，其乙醇的***终含量占67%左右。 因而也可改用95%乙醇来替代无水乙醇(因为无水乙醇的价格远远比95%乙醇昂贵)。

　　但是加95%的乙醇使总体积增大，而DNA在溶液中有一定程度的溶解，因而DNA损失也增大， 尤其用多次乙醇沉淀时，就会影响收得率。折中的做法是初次沉淀DNA时可用95%乙醇代替无水乙酵， 后面的沉淀步骤要使用无水乙醇。也可以用0.6倍体积的异丙1醇选择性沉淀DNA。一般在室温下放置15-30分钟即可。

病毒核酸提取就像'针尖上跳舞'

检验的首要一步是病毒核酸提取，这也是******的一步，需要在专门的生物安全二级实验室里进行。检测人员要在清洁区穿戴两套防护服、两副乳胶手套，戴护目镜，穿靴套，前后穿过6道门，才能到达核心实验区，病毒核酸提取就像是“针尖上的舞蹈”。“每次脱下防护服，衣服都湿透了。在2—4个小时的病毒核酸提取实验过程中，一般都会安排两人一组进行检验，既是规定要求，也是防止工作人员在密闭的负压实验空间里出现意外。