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动物细胞培养

高速冷冻离心机在所有的细胞离体培养中，困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。

⑴血1清：动物细胞离体培养常常需要血1清。相对常用的是小牛血1清。血1清提供生长必需因子，如激1素、微量元素、矿物质和脂肪。在这里，血1清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。

⑵支持物：大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用玻璃，塑料等作为支持物。

⑶气体交换：二氧化碳和氧气的比例要在细胞培养过程中不断进行调节，不断维持所需要的气体条件。

细胞冻存

细胞密度达到80%～90%时，去培养基，10ml PBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶，放人细胞培养箱3min。加入lmlDMEM完全培养基终止胰酶消化，转移至15ml离心管。加入10ml PBS清洗细胞培养盘，转移至15ml离心管，2000rpmX2min，弃上清液。

加入lml冻存液（90%血1清，10%DMSO），放入冻存盒内（盒内有异丙1醇，以保证温度降低的速度），立即放入一80℃冰箱内，过夜，第二天放入液氮中，可以保存至少两年，如不放人液氮，可以保存三个月。

冻存液的配制：70%的完全培养基+20%FBS+10%DMSO.DMSO要慢慢滴加，边滴边摇。

细胞活性是判断体外培养细胞在某些条件下是否能正常生长的重要指标，如medicine处理、放1射性或紫外线照射、培养条件变化等。细胞活性检测指标通常包括细胞膜对核酸染料的通透性、代谢活性、膜电位等。

细胞活性的检测相当于细胞增殖能力的测定，采用特殊的***测定细胞的代谢活力或细胞代谢产物，通过检测细胞的氧化还原活性反映细胞增殖能力，属于间接检测细胞增殖能力的方法。

在德国施旺和施莱登之后的十年，科学家陆续发现新的证据，证明细胞都是从原来就存在的细胞分裂而来，而至21世纪初期的细胞学说大致上可以简述为以下三点：细胞为一切生物的构造单位、细胞为一切生物的生理单位、细胞由原已生存的细胞分裂而来。“细胞”一词早出现在日本兰学家宇田川榕庵1834年的著作《植学启原》。中国自然科学家李善兰1858年在其著作《植物学》中使用“细胞”作为Cell的中文译名  。有学者认为李善兰此时并未接触过《植学启原》，因而是独自发明。