腺病毒载体系统承诺守信「多图」

PEG法

　　其基本原理是在二价阳离子（Mg2+、Ca2+等）存在的情况下，PEG能够有效地诱导DNA产生颗粒状沉淀，从而使细胞膜能够通过内吞噬作用吸收这种DNA颗粒。

　　1993年Golovkin等用PEG法将H89的原生质体与含有鼠二氢叶酸还原酶（DHFR）突变***（氨甲1喋呤抗性）的质粒共培养，此***插入了玉米Ds1转座子中。筛选得到的愈伤***，在不含激1素的培养基上再生长出植株。同年Omirulleh等用PEG法将外源***导入到了HE89的原生质体中，建立了植株再生的转化体系。

　　PEG法虽然转化效率较高，但必须以裸1露的原生质体为受体，而且还受到***型的限制。

第yi代腺病毒载体：一般将E1或E3***缺失的腺病毒载体称为第yi代腺病毒载体，此类型载体在未经过纯化时可引发机体产生较强的炎1症反应和免1疫反应，纯化后可以安全使用，体内表达周期可达4周。

第二代腺病毒载体：E2A或E4***缺失的腺病毒载体被称为第二代腺病毒载体，产生的免1疫反应较弱其载体容量和安全性方面有所改进，但病毒包装难度和出毒和病毒滴度下降厉害，应用相当局限。

第三代腺病毒载体：第三代载体缺失了全部的（无病毒载体，gutless vector）或大部分腺病毒***（微型腺病毒载体，mini Ad），仅可保留ITR和包装信号序列。第三代腺病毒载体***大可插入35kb的***，病毒蛋白表达引起的细胞免1疫反应进一步减少，载体中引入核基质附着区***可使得外源***保持长期表达，并增加了载体的稳定性。这一载体系统需要一个腺病毒突变体作为辅助病毒。

在格雷戈尔·孟德尔之前，人们曾认为遗传是一个混合过程，但是孟德尔证实存在一种不可分割和***的遗传单位，后来人们证实这种遗传单位就是存在于染色体上的***——一段DNA序列。孟德尔在***水平上揭示了有性生殖的遗传过程（称之为“分离定律”与“自由组合”定律），虽然他那时并不知道***的真实存在形式 [1]  。注意***和DNA是完全不同的概念。



***是控制生物性状的基本遗传单位。19世纪60年代，奥地利遗传学家格雷戈尔·孟德尔就提出了生物的性状是由遗传因子控制的观点，但这仅仅是一种逻辑推理。20世纪初期，遗传学家摩尔根通过果蝇的遗传实验，认识到***存在于染色体上，并且在染色体上是呈线性排列，从而得出了染色体是***载体的结论。1909年丹麦遗传学家约翰逊（W. Johansen，1859～1927）在《精密遗传学原理》一书中正式提出“***”概念。