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　　农杆1菌转化法在植物遗传转化中的应用：过去认为受农bacillus宿主范围限制，农bacillus介导的遗传转化只限于双子叶植物。1987年Grimsly首先将玉米条斑病毒的cDNA克1隆至质粒上，用农bacillus侵染的方法将玉米条斑病毒的cDNA导入玉米，使植株表现了系统感1染症状。这个报道有力地证明了农bacillus能够侵染玉米这种单子叶植物。随着载体系统和转化方法的改进，农bacillus介导的遗传转化不再局限于双子叶植物，在一些单子叶植物如水稻、玉米和小麦等重要的农作物上也相继获得成功。

　　进入20世纪90年代后，农杆1菌转化法在水稻、玉米等重要的农作物上取得突破性进展。首先是1991年Gould和Shen等利用农bacillus转化玉米茎尖分生***获得转0***植株。1998年Lupotto也实现了农bacillus转化玉米的成功，Southern杂交结果显示外源***能够稳定遗传到下一代。

真核细胞同源重组法

1994 年，Graham F建立了在293细胞同源重组产生重组腺病毒的方法。这个方法需要2个质粒：骨架质粒含有腺病毒绝大部分***组序列，但不含有包装信号；穿梭质粒含有ITR、包装信号和目的***克1隆位点，以及两段与骨架质粒有重叠的序列。将目的***克1隆到穿梭质粒，与骨架质粒共转染293细胞，由于这两个质粒的部分序列有重叠，能够在细胞内发生同源重组，***终产生完整的载体***组，并包装出重组病毒颗粒。该方法曾经被广泛使用，推动了腺病毒载体的发展。由于细胞内重组效率低，某些重组事件还可能产生可copy病毒(RCV)，必需经过噬斑纯化才能获得正确的克1隆化的重组病毒，费时费力，正逐渐被其他方法替代。

腺病毒感1染后可获得对同型的持久免1疫力

与绝大多数呼吸道感1染的病原相比，机体对腺病毒的再感1染能产生有效的免1疫。起保护作用的是体内产生的循环中和抗1体。正常的健康***一般也具有多型的抗1体。约40%～60%的6～15岁的人具有1、2和5型中和抗1体，但3、4和7型抗1体很少。母亲的抗1体能保护***免除严重的腺病毒呼吸道感1染。

腺病毒传播特点

宿主范围广对人致病性低，腺病毒载体系统可广泛用于人类及非人类蛋白的表达。腺病毒可感1染一系列哺乳动物细胞，因此在大多哺乳动物细胞和***中均可用来表达重组蛋白。特别需要指出的是：腺病毒具有嗜上皮细胞性，而人类的大多数的肿1瘤就是上皮细胞来源的。另外，腺病毒的copy***和致病***均已相当清楚，在人群中早已流行（70-80%***体内都有腺病毒的中和抗1体存在）。人类感1野1生型腺病毒后仅产生轻微的自限性症状，且病毒唑cure有效。