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发布时间:2022-01-24 21:19:42
T4 RNA连接酶
用途:用RNA 3'末端标记;RNA和RNA分子间连接;寡核苷酸的环化;tRNA修饰;5' RACE中寡核苷酸连接到cDNA单链;在蛋白质特***点引入非天然氨基酸。
来源:由大肠杆1菌表达,表达***的来源为T4嗜菌体。
活性定义:37℃30分钟内,催化1 nmol 5'-[P]-(A)12-18成为磷酸酶不能消化的环形产物所需的酶量定义为1个活性单位。
活性检测条件:50mM Tris-HCl(pH7.5),10mM MgCl2,10mM DTT,1mM ATP,10μM 5'-[P]-(A)12-18(10μM in 5'-termini)。
纯度:不含DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶,不含磷1酸酯酶。
酶储存溶液:10mM Tris-HCl(pH7.5),1mM DTT,50mM KCl,0.1mM EDTA,50%(v/v)glycerol。
Reaction Buffer(10X):500mM HEPES-NaOH(pH8.0 at 25℃),100mM MgCl2,100mM DTT。
低碱性磷酸酶血症的症状存在异质性,其临床症状多样,需要及时进行cure
典型症状
1、单纯牙型乳牙会出现早期脱落的情况,仅仅表现出牙齿受累的症状表现。
2、围生期型患者会出现四肢短小的症状,主要因为严重骨骼矿化不足,然后造成骨骼系统异常的症状表现。
3、良性新生儿型患者会出现骨骼畸形的情况,比如漏斗胸,以及身材矮小的症状,但是这种类型的症状,在出生以后可以达到改善。
4、***型患者会出现牙齿早脱的症状,通过X-ray检查,可以显示未成熟牙齿早失的症状,如果出现佝偻病的情况,患者会出现胸廓畸形、头颅畸形的症状,患者的囟门会变得宽大,但是常常会出现颅缝早闭的情况。
DNA copy主要的特点是半保留copy、半不连续copy。在copy过程中,原来双螺旋的两条链并没有被***,它们分成单独的链,每一条旧链作为模板再合成一条新链,这样在新合成的两个DNA分子中,一条链是旧的而另外一条链是新的,因此这种copy方式被称为半保留copy。
DNA的两条链是反向平行的,一条是 5'→3'方向,另一条是 3'→5'方向。在copy起点处,两条链解开形成copy泡(replication bubble ), DNA向两侧copy形成两个copy叉(replication fork)。随着DNA的不断解旋,两条链变成单链形式,可以作为模板合成新的互补链。但是,生物细胞内所有的DNA聚合酶都只 能催化 5'→3'延伸。因此,以3 '→5'的链为模板链时,DNA聚合酶可以沿 5'→3'的方向合成互补的新链,这条链称为前导链(leading strand )。当以另一条链为模板时则不能连续合成新链,这条链称为滞后链(lagging strand )。这时,DNA聚合酶从copy叉的位置开始向远离copy叉的方向合成1?2 kb的新链片段,待copy叉向前移动相应的距离后,又重复这一过程,合成另一个类似大小的新链片段,这些片段被称为冈崎片段(Okazaki fragment)。***后,由另一种DNA聚合酶和DNA连接酶负责把这些冈崎片段之间的RNA引物除去,并把缺口补平,使冈崎片段连成完整的DNA链。这种前导链的连续copy和滞后链的不连续copy在生物细胞中是普遍存在的,称为DNA的半不连续copy。
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