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基于***工程技术制备小分子特异性antibody

通过大量的实验发现，小分子的偶联物并不是不能产生特异性针对小分子的抗1体，而是效价过低，不满足制备多克1隆抗1体和单克1隆抗1体的需要，但是***工程手段为制备该类型小分子特异性antibody提供了新的思路。该技术的核心在于制备antibody的***文库，通过噬菌体展示技术、核糖体展示技术等获取antibody的目的***，再利用蛋白表达系统制备重组antibody或者改造antibody，以获取针对小分子的特异性antibody。目前随着antibody***测序信息的公布和完善，为人工设计antibody提供了基础，这也会以后小分子特异性antibody的制备提供了新的途径。

如何确认RNA的质量

实时荧光定量PCR技术是通过测定RNA的转录水平来评估***的活力。RNA样本提取的质量直接影响***表达分析。影响RNA品质的因素有以下三种：RNA浓度、RNA纯度和RNA完整性。

检测RNA浓度、纯度和完整性的方式主要有以下几种：

紫外分光光度计法：

测量260nm吸收值计算RNA浓度，测量260nm/280nm吸收值的比值，用于评估RNA纯度。需要注意的是：在检测核酸物质时应该在固定的PH溶液中进行。

260nm/280nm的比值范围在 1.9~2.1 之间。＜1.9，说明有蛋白质残留；＞2.1，说明RNA可能发生降解。

琼脂糖凝胶电泳：

完整的RNA通常有三条带，***亮的是28S条带，其次是18S条带，***淡的是5S条带（部分***盒提取时会过滤掉5S条带）。通过琼脂糖凝胶电泳可以检测28S和18S的比值。该方法主要用于检测RNA的纯度和完整性。

如果28S和18S条带明亮、清晰、条带锐利，28S的亮度在18S条带的两倍以上，我们认为RNA的质量***好。

若RNA条带出现弥散，原因可能：RNA被核酸酶降解、电压或电流过大、上样量过高或过低等。

转移RNA

转移RNA（tRNA）在蛋白质合成过程中负责转运氨基酸、解读mRNA遗传密码。tRNA占细胞总RNA的10%~15%，绝大多数位于细胞质中。tRNA由Crick于1955年提出其存在，Zamecnik和 Hoagland于1957年鉴定。

tRNA一级结构具有以下特点：

①是一类单链小分子RNA，长73~95nt（共有序列76nt），沉降系数4S。

②是含稀有碱基***多的RNA，含7-15个稀有碱基（占全部碱基的15%~20%），位于非配对区。

③5′末端碱基往往是鸟piao呤。

④3'端是CCA序列，其中的腺苷酸常称为A76，其3’—OH是氨基酸结合位点。