腺病毒载体承诺守信「多图」

电1击法

　　电1击法基本原理是电脉冲使细胞膜产生可逆性的“微孔”，外源DNA可通过这些微孔进入受体细胞原生质体内。

　　1985年Fromm等用electric shock法将pat***导入了玉米原生质体，得到了该***稳定表达的愈伤***。随着玉米原生质体再生技术的研究取得进展，1988年Rhodes等用electric shock法转化玉米原生质体，初步获得了完整的转0***植株。electric shock法还可以对幼胚、愈伤***和胚性悬浮细胞系进行遗传转化。1992年D’Hallum K等以玉米幼胚和愈伤***为受体，用electric shock法导入neo***，获得了可育的转0***植株，并且neo***能稳定地遗传给后代。1993年Sukhapinda等用electric shock法转化从玉米花粉愈伤***分离的原生质体，将gusA和nptⅡ转入原生质体，获得单倍体转化植株。1994年Laursen等以果胶降解酶处理悬浮细胞系后，通过electric shock法导入bar***，也获得了可育的转0***玉米。

　　电1击法操作简单，不受宿主限制，在遗传转化技术研究的初期得到了较为广泛的应用，但是它的转化效率较低，而且对有壁细胞或***的转化效果较差。

腺病毒是无胞膜的线性双链DNA病毒，目前腺病毒科分为5个属，有多种型别的腺病毒已经被开发为***转移载体，在基础科研、***cure和载体疫1苗领域得到广泛应用。

腺病毒的***组长约26-46kb，这使得腺病毒载体的构建与常见质粒载体(一般长度小于10kb)不同。太长的***组使得在腺病毒载体上富集一个多克1隆位点非常困难。针对重组腺病毒的构建，开发了多种方法。

目前已有的腺病毒载体系统均存在缺陷，有些构建步骤繁琐，耗时较长，有些在重组病毒中引入了不必要的外源序列，有些不能用于重组腺病毒的反向遗传改造。近年来，新的生物特性不同的腺病毒不断被发现，因此，本领域对构建过程更加快捷简便的、人工改造更加方便灵活的腺病毒载体系统和重组病毒构建方法存在需求。

20世纪50年代以后，随着分子遗传学的发展，尤其是沃森和克里克提出DNA双螺旋结构以后，人们进一步认识了***的本质，即***是具有遗传效应的DNA。研究结果还表明，每条染色体只含有1～2个DNA分子，每个DNA分子上有多个***，每个***含有成百上千个脱氧核苷酸。自从RNA病毒发现之后，***的存在方式不仅仅只存在于DNA上，还存在于RNA上。由于不同***的脱氧核糖核苷酸的排列顺序（碱基序列）不同，因此，不同的***就含有不同的遗传信息。1994年中科院曾邦哲提出系统遗传学概念与原理，探讨猫之为猫、虎之为虎的***逻辑与语言，提出***之间相互关系与***组逻辑结构及其程序化表达的发生研究。