分子伴侣蛋白承诺守信「友名生物」

1.与传统的蛋白表达系统相比，省略了耗时耗力的质粒转化、细胞培养、收集、破碎和离心等, 极大地提高了工作效率； 

2. 反应体系小，能同时平行合成多种不同的蛋白质； 

3. 反应周期短，能满足高通量配体筛选和蛋白质组学的科研要求；

 4. 开放的反应体系，便于改变各项反应条件，有利于调控***的转录，蛋白质的合成和翻译后修饰，避免包涵体的形成；

 5. 稳定的反应体系，可以偶联其它工艺，形成自动化、程序化、规模化生产，加快重组蛋白的纯化、功能表征和后续的结构解析；

 6. 无细胞结构限制，可用于生产对宿主***1害作用的外源蛋白，避免蛋白表达对宿主细胞的致死作用；

 7. 添加非天然氨基酸或同位素标记氨基酸，表达特殊蛋白。

 8.对于多次跨膜或由于疏水性强导致的普通细胞系表达困难的项目有显著改善。

无细胞系统是利用细胞提取物（而不是细胞）进行***转录和翻译的系统。一个无细胞***表达系统主要包括三个部分：细胞提取物，反应混合液，以及核酸模板

1.细胞提取物：从细胞中提取的物质，主要包含核糖体、RNA聚合酶、其他转录和翻译蛋白（比如σ因子、起始因子和延伸因子），以及用于能量代谢的酶和辅因子。在有些菌株的提取物中，可能***了蛋白酶和核酸酶的活性。

2.反应混合液：包含蛋白质合成所需的一些原料，如氨基酸、核苷酸、盐离子（如铵盐、镁、钾）、能源（糖类、磷酸肌酸等）、拥挤***（crowding agents）、代谢辅因子（辅酶A、NAD）、缓冲液、tRNA以及其他代谢添加剂等。

3.核酸模板：可以是质粒DNA或PCR产物线装DNA，浓度通常在1-20 nM。

无细胞系统一般的反应体积为10微升，但是根据其实际应用，反应体系可以从10^(-15)到10^3变化。在开始反应时，将三种组分在16-37℃下孵育，蛋白质合成将在1-24h内进行。

folin―酚***法（lowry法）是蛋白质测定法中较灵敏的方法之一。过去此法是应用相对广泛的一种方法，由于其***乙的配制较为困难（现在已可以订购），近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种***，即folin―酚***，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深兰色的原因是：在碱性条件下，蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物。folin―酚***中的磷钼酸盐―磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原，产生深兰色（钼兰和钨兰的混合物）。在一定的条件下，兰色深度与蛋白的量成正比。



蛋白质在胃液消化酶的作用下，初步水解，在中完成整个消化吸收过程。氨基酸的吸收通过黏膜细胞，是由主动运转系统进行，分别转运中性、酸性和碱性氨基酸。在肠内被消化吸收的蛋白质，不仅来自于食物，也有肠黏膜细胞脱落和消化液的分泌等，每天有70g左右蛋白质进入消化系统，其中大部分被消化和重吸收。未被吸收的蛋白质由粪便排出体外。