核酸纯化在线咨询 友名生物公司

1.人ELISA***盒在测定时，受检标本（测定其中的antibody或抗原）与固相载体表面的抗原或antibody起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原antibody复合物与液体中的其他物质分开。　　

2.再加入酶标记的抗原或antibody，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。　　

3.加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。　　

4.由于酶的催化效率很高，间接地放大了免1疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。ELISA可用于测定抗原，也可用于测定antibody。　　

5.然而，影响Elisa试验结果的因素很多，故加强各个环节的才能充分发挥其方法学的优点。

选择素elisa***盒的实验原理

选择素elisa***盒是一类异亲型结合、Ca2+依赖的细胞粘着分子，能与特异糖基识别并结合。主要参与白细胞与血管内皮细胞之间的识别与粘着。

实验原理：

将目标包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入品或标本，其中的目标连接于固相载体上的结合，然后加入微生***的目标，将未结合的生物素洗净后，加入HRP标记和亲和素，再次洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶1标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。

精密度：精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV（%）=SD/mean×100

批内差：取同批次选择素elisa***盒对低、中、高值定值样本进行定量检测，每份样本连续测定20次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。

批间差：选取3个不同批次的***盒分别对低、中、高值定值样本定量测定，每个样本使用同一***盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。

批内差： CV<10% Inter-批间差： CV<13%

经测定，***盒在X期内按推荐温度保存，其活性率小于5%。为减小外部因素对***盒前后检测值的影响，实验室的条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可人为误差。

选择素elisa***盒识别的配体都是一些寡糖基团，迄今为止发现的配体都是一些具有唾液酸化路易斯寡糖(s-Le，siaglyl-Lewis)或类似结构的分子。一种寡糖基团可以存在多种糖蛋白和糖脂分子上，并分布于多种细胞表面，因此选择素分子配体在体内分布较为广泛。

RNA病毒检测***盒用于定性检测和分析RNA病毒和RNA分子，特别适合检测病毒等此类病毒。

组分1. ConviFlex? RT-Taq Mix的冻干粉包含：MuLV逆转录酶、Taq聚合酶及dNTP。

其中MuLV逆转录酶，来自小鼠白血1病病毒（M-MuLV）并经过***修饰。

这里的Taq聚合酶另兼具热启动功能。

此Taq酶在室温下，活性被抗1体所***，当温度达到70°C以上时，才会被完全激1活。

在70°C 以下时，由于Taq酶没有完全活化，因此实验不会产生非特异性PCR产物和引物二聚体。热启动Taq酶的使用可使PCR具有更高的特异性和灵敏度。

DNA提取过程中各种***的作用及原理

溶液II-NaOH-SDS液：NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。但当pH>12或pH<3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。 在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1/L，加抽提液时，该系统的pH就高达12.6， 因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。

　　SDS：

　　SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有：

　　(1)溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而***细胞膜。

　　(2)解聚细胞中的核蛋白。

　　(3)SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R+-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。 但是SDS能***核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中 (用RNase去除RNA时)受到干扰。