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mRNA切割酶推荐「友名生物」

发布时间:2021-11-25 01:33:03        








根据限制酶的结构,辅因子的需求切位与作用方式,可将限制酶分为三种类型,分别是第yi型(Type I)、第二型(Type II)及第三型(Type III)。  

第yi型限制酶同时具有修饰(modification)及认知切割(restriction)的作用;另有认知(recognize)DNA上特定碱基序列的能力,通常其切割位(cle***age site)距离认知位(recognition)可达数千个碱基之远。例如:EcoB、EcoK。  

第二型限制酶只具有认知切割的作用,修饰作用由其他酵素进行。所认知的位置多为短的回文序列(palindrome sequence);所剪切的碱基序列通常即为所认知的序列。是遗传工程上,实用性较高的限制酶种类。例如:EcoRI、HindIII。  

第三型限制酶与第yi型限制酶类似,同时具有修饰及认知切割的作用。可认知短的不对称序列,切割位与认知序列约距24-26个碱基对。例如:EcoPI、HinfIII。




  限制性内切酶已有百余种,每种酶有其特定的核苷酸序列识别特异性,酶的活性需Mg+2来激1活。不同的酶也有许多差别:有些酶除需Mg+2外,还需ATP 等其他辅助因子的激1活;切割位点和识别序列间的距离不同;有的内切酶同时具有甲1基化作用。根据这些差别,可将限制性内切酶分为I、II 和III 种类型。II 型限制性内切酶只需要二价镁离子的激1活,酶在其识别序列内切割双链DNA,产生的各种DNA部分片段具有相同的末端结构,而且大多数的II 型酶可提供粘性未端,有利于片段再连接,大部分II 型酶所识别的序列具有反向对称的结构,或称之回文结构。如EcoRI 和HindIII 的识别和切口分别为:

  EcoRI : G ↓AATT C HindIII : A↓AGCT T

  T TCGA↑ A C TTAA↑G



几种酶的比较及限制酶

1几种酶的比较

(1)限制性内切酶:作用于DNA分子,切割磷酸二酯键,形成黏性末端或平末端。

(2) DNA连接酶:作用于DNA分子片段,连接磷酸二酯键,形成重组DNA分子。

(3) DNA聚合酶:作用于脱氧核苷酸,连接磷酸二酯键,形成新的DNA分子。

(4)解旋酶:作用于DNA分子,作用于氢键,形成DNA分子的单链。

2.限制酶:

(1)一种限制酶通常只识别一种特定的碱基序列,但是有少数限制酶却可以识别不止

一种碱基序列。

(2)不同限制酶也可以识别同-碱基序列;

(3)不同限制酶识别的碱基序列虽然不同,但切出的末端也可能相互连接。






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