细胞裂解液信赖推荐「友名生物」

人ELISA***盒的原理及优势：

　　1、ELISA是以immune学反应为基础，将抗原、antibody的特异性反应与酶对底物的有效催化作用相结合起来的一种敏***很高的试验技术。

　　2、由于抗原、antibody的反应在一种固相载体──聚苯乙1烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种***孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。

　　3、Elisa生物试验是一种敏***高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。由于其***稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在immune学检验的各领域中。

　　4、ELISA检测***盒适用于体外定性检测人血1清或血浆中的抗人类HEV病毒Mantibody ELISA检测。

　　5、ELISA的基础是抗原或antibody的固相化及抗原或antibody的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或antibody仍保持其immune学活性，酶标记的抗原或antibody既保留其immune学活性，又保留酶的活性。

传统小分子特异性antibody制备技术

为解决小分子这类半抗原物质无法刺激宿主动物产生antibody的特性，必须将半抗原回复完全抗原的特性。解决这个问题可以通过将小分子和对宿主动物immune原性很强的物质：如OVA、BSA、KLH等偶联，将其制备成完全抗原，通过immune宿主动物，便能促使宿主动物产生针对小分子的特异性antibody，这类antibody通过抗原特异性的筛选便能获取目的antibody。目前，通过此项技术能解决绝大多数小分子特异性antibody的制备，但是也可能由于小分子的结构特异，偶联物和偶联方式的选取、偶联率的差异以及immune技术有待发展等多方面的因素使其特异性antibody的制备存在困难。

从动物***中提取***组DNA

使用研钵进行匀浆时：

① 取1～100 mg的动物***或人***移入冰浴预冷的研钵中，快速用力展研成匀浆。注）下列***请加液氮研磨至粉末状。

A．富含DNA酶的胰脏、脾1脏、胸腺、淋巴等***。

B．富含胶原蛋白的皮肤、肌腱等***。

C．富含角质蛋白的***或坚硬的***（如骨骼）等。

② 加入650 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1，温和研磨30秒钟。注）使用上述①-注）的实验材料时，请在加入Solution A及RNase A1后，将研钵置于65℃水浴上研磨1分钟。

③ 收集650 μl研磨好的***匀浆液移至Collection Tube中。如果匀浆体积不足650 μl，请补充Solution A至650 μl，65℃保温5分钟。

使用研磨棒进行匀浆时:

① 取1～100 mg的动物***或人***移入冰浴预冷的Collection Tube 中，用研磨棒快速研磨成糊状。

② 加入350 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1后用研磨棒快速研磨成匀浆。

③ 加入350 μl的Solution A将研磨棒上的匀浆冲入Collection Tube中，充分振荡混合后，65℃保温5分钟。

用乙醇沉淀DNA时为什么一定要加NaAc或N***

　　在pH为8左右的溶液中，DNA分子是带负电荷的，加一定浓度的NaAc或N***，使Na+中和DNA分子上的负电荷， 减少DNA分子之间的同性电荷相斥力，易于互相聚合而形成DNA钠盐沉淀，当加入的盐溶液浓度太低时， 只有部分DNA形成DNA钠盐而聚合，这样就造成DNA沉淀不完全，当加入的盐溶液浓度太高时， 其效果也不好。在沉淀的DNA中，由于过多的盐杂质存在，影响DNA的酶切等反应，必须要进行洗涤或重沉淀。

　　加核糖核酸酶降解核糖核酸后，为什么再要用SDS与KAc来处理?

　　加进去的RNase本身是一种蛋白质，为了纯化DNA，又必须去除之，加SDS可使它们成为SDS-蛋白复合物沉淀，再加KAc使这些复合物转变为溶解度更小的钾盐形式的SDS-蛋白质复合物，使沉淀更加完全。也可用饱和酚、*抽提再沉淀，去除RNase。在溶液中，有人以KAc代替NaAc，也可以收到较好效果。

　　在***操作实验中，磷酸盐缓冲系统(pKa=7.2)和硼酸系统(pKa=9.24)等虽然也都符合细胞内环境的生理范围(pH)，可作DNA的保存液，但在转化实验时，磷酸根离子的种类及数量将与Ca2+产生Ca3(PO4)2沉淀，在DNA反应时，不同的酶对辅助因子的种类及数量要求不同，有的要求高离子浓度，有的则要求低盐浓度，采用Tris-HCl(pKa=8.0)的缓冲系统，由于缓冲液是TrisH+/Tris，不存在金属离子的干扰作用，故在提取或保存DNA时，大都采用Tris-HCl系统，而TE缓冲液中的EDTA更能稳定。