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***枪转化法

气动式***枪中具有代表性的是PDS-1000/He，利用由不同厚度的聚苯四甲酰亚1胺膜制成的可裂圆片来调控氦气压力。当氦气压力达到可裂圆片的临界承受压力时，可裂圆片破1裂并产生强烈的气流，使微弹载体携带微弹高速运动，遇到刚性的阻挡网，微弹载体被阻遏，而微弹利用惯性继续向前高速运动，轰击靶1细胞或***，从而携带外源***进入细胞内。***枪法不再受到受体***型的限制，又能避开原生质体再生的障碍，从而使植物的遗传转化翻开了新的一页。

***枪转化法在植物遗传转化中的应用：应用***枪法转化***早的是Klein等人在1987年将携带有***氯霉1素乙酰转移酶（cat）***的烟1草花叶病毒的RNA导入洋葱的表皮细胞，使此***得到表达。后来，随着对物理参数（如金属粒子的理化特性、DNA与金属粒子的结合和靶***特性等）、环境条件（如受体植株、外植体和靶***所适宜的温度、湿度和光照等）和生物因子（如外植体及其轰击前后的培养条件等）等的技术优化，不断完善的***枪转化技术能实现对许多受体材料的转化，包括原生质体、悬浮细胞系、愈伤***、外植体（幼穗、幼胚或成熟胚），甚至可以直接轰击转化花粉。

***导入细胞常用方法

不同的载体在不同的宿主细胞中繁殖，导入细胞的方法也不相同。

由于外源DNA的进入而使细胞遗传性改变称为转化，早在1943年，***ery等就发现***肺1炎双球菌的DNA与***肺1炎双球菌共培养后产生***性的肺1炎双球菌后代的转化现象。但DNA进入细胞的效率很低，在分子生物学和***工程工作中可采取一些方法处理细胞，经处理后的细胞就容易接受外界DNA，称为感受态细胞，再与外源DNA接触，就能提高转化效率。例如大肠杆1菌经冰冷C***2的处理，就成为感受态***，当加入重组质粒并突然由4℃转入42℃作短时间处理，质粒DNA就能进入***；用高电压脉冲短暂作用于***也能显著提高转化效率，这称为电穿孔（electroporation）转化法

20世纪40年代以前，对于***的化学本质并不了解。直到1944年O.T.埃弗里等证实双球菌的转化因子是DNA，才用实验证明了***是有遗传效应的DNA段。

1955年S.本泽用大肠T4噬菌体作材料，研究快速溶菌突变型rⅡ的***精细结构，发现在一个***内部的许多位点上可以发生突变，并且可以在这些位点之间发生交换，从而说明一个***是一个功能单位，但并不是一个突变单位和交换单位，因为一个***可以包括许多突变单位（突变子）和许多重组单位（重组子）（见互补作用）。

1969年J.夏皮罗等从大肠中分离到乳糖操纵子，并且使它在离体条件下进行转录，证实了一个***可以离开染色体而***地发挥作用，于是颗粒性的遗传概念更加确立。随着重组DNA技术和核酸的顺序分析技术的发展，对***的认识又有了新的发展，主要是发现了重叠的***、断裂的***和可以移动位置的***。