腺病毒载体系统服务介绍「多图」

***表达产物通常是蛋白质，但是非蛋白质编码***如转移RNA（tRNA）或小核RNA（snRNA）***的表达产物是功能性RNA。

所有已知的生命，无论是真核生物（包括多细胞生物）、原核生物（***和古***）或病毒，都利用***表达来合成生命的大分子。***表达可以通过对其中的几个步骤，包括转录，RNA剪接，翻译和翻译后修饰，进行调控来实现对***表达的调控。***调控赋予细胞对结构和功能的控制，***调控是细胞分化、形态发生以及任何生物的多功能性和适应性的基础。***调控也可以作为进化改变的底物，因为控制***表达的时间、位置和量可以对***在细胞或多细胞生物中的功能（作用）产生深远的影响。在遗传学中，***表达是***型产生表型的基本水平。存储在DNA中的遗传密码通过***表达得到“翻译”，并且***表达的特性产生生物体的表型。因此，***表达的调节对于生物体的发育至关重要。

农bacillus转化法

　　农bacillus包括引起植物冠瘿瘤的根***农bacillus和引起发根病的发根农杆1菌。根***农杆1菌和发根农bacillus有相似的遗传背景。在农bacillus介导的转化中，80%左右是由根***农bacillus介导的，大约20%是由发根农bacillus介导的。这里主要介绍根***农杆1菌介导的转化。

　　根***农bacillusTi质粒上有一段转移DNA（T-DNA）和Vir区，在农bacillus侵染植物时，这段T-DNA可以插入到植物***组中，使其携带的***在植物中得以表达。Vir区共24个***，它们表达的蛋白与T-DNA的加工和转移有关。

腺病毒是无包膜的线性双链DNA病毒，在自然界分布广泛，至少存在100种以上的血1清型。其***组长约36kb，两端各有一个反向末端重复区（ITR），ITR内侧为病毒包装信号。***组上分布着4个早期转录元（E1、E2、E3、E4）承担调节功能，以及一个晚期转录元负责结构蛋白的编码。早期***E2产物是晚期***表达的反式因子和copy必须因子，早期***E1A、E1B产物还为E2等早期***表达所必须。因此，E1区的缺失可造成病毒在copy阶段的流1产。E3为copy非必须区，其缺失则可以大大地扩大插入容量。腺病毒载体大多以5型（Ad5）、2型（Ad2）为基础，新增了55型（Ad55），很多研究机构在研究当中，55型将比5型流行以及应用更具广泛性。

典型的腺病毒载体系统如：穿梭质粒pCA13/腺病毒***组质粒pBHG11/包装细胞293细胞。pCA13/的HCMV IE启动子－多克1隆位点－SV40 AN（poly A）构成外源***的表达盒，该表达盒的插入使腺病毒E1***缺失，但是保留其两端侧翼序列（左侧的1~3bp的ITR，右侧从3.5kb到末端的维持病毒装配和活力必须的蛋白IX的***），也保留了腺病毒的包装信号

φ（194~358bp）；pBHG11则保留了腺病毒***组的绝大部分，但是缺失了包装信号φ、0.5~3.7图距（mu）部分的E1区、77.5～86.2mu的E3区，293细胞是整合有Ad5 E1***的人胚shen细胞系。pBHG11因为缺失包装信号及E1区而不能copy，pCA13带有包装信号及E1的侧翼序列，但是缺失E1区及腺病毒绝大部分***组，同样不能copy。外源目的***插入pCA13后，与pBHG11共转染，进入293细胞。pCA13与pBHG11在细胞内发生同源重组，同时，293细胞提供E1蛋白，从而包装产生腺病毒颗粒。该病毒的蛋白质外壳同野1生型腺病毒相似，具有同样的感1染力进入靶1细胞的能力，但是***组DNA的E1区被外源目的***取代，即进入靶1细胞后病毒不能copy，但可以表达目的蛋白。