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发布时间:2021-11-12 18:40:05
细胞增殖是生活1细胞的重要生理功能之一,是生物体的重要生命特征。细胞的增殖是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础。
越来越多的研究者们已经把目光集中到了细胞增殖检测,关于细胞增殖检测的方法也在不断更新。那么到目前为止,研究细胞增殖有哪些手段呢?
细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿1瘤medicine效果的基础实验手段。准确的检测细胞增殖方法是BrdU法。而EdU法检测***盒是Brdu方法的革命性突破。EdU***盒是一种嘧1啶类似物,可以在DNA合成期整合入DNA双链。通过以上原理图的对比,大家不难发现,EdU法检测细胞增殖,无须抗1体,无变性步骤,保持细胞形态和DNA完整性,是一种简单,可靠,省事的创新方法。
转移RNA
转移RNA(tRNA)在蛋白质合成过程中负责转运氨基酸、解读mRNA遗传密码。tRNA占细胞总RNA的10%~15%,绝大多数位于细胞质中。tRNA由Crick于1955年提出其存在,Zamecnik和 Hoagland于1957年鉴定。
tRNA一级结构具有以下特点:
①是一类单链小分子RNA,长73~95nt(共有序列76nt),沉降系数4S。
②是含稀有碱基***多的RNA,含7-15个稀有碱基(占全部碱基的15%~20%),位于非配对区。
③5′末端碱基往往是鸟piao呤。
④3'端是CCA序列,其中的腺苷酸常称为A76,其3’—OH是氨基酸结合位点。
总RNA的抽提方法:
目前常用的方法是用异硫qing酸胍苯1酚抽提法。
提取步骤:
先用液氮研磨材料,匀浆,加入Trizol***,进一步破碎细胞并溶解细胞成分。然后加入氯1仿抽提,离心,分离水相和有机相,收集含有RNA的水相,通过异丙1醇沉淀,获得比较纯的总RNA,用于下一步mRNA的纯化。也可将含有RNA样品的细胞破碎液通过硅胶膜纯化柱纯化。
RNA浓度和纯度判断:
OD260为1时相当于浓度为50 ug/mL;
OD260/0D280值在1.8~ 2.0之间,表示纯度较好;
0D260/OD280值低于1.8,样品有蛋白质或酚污染;
0D260/0D280值大于2.0,提取的RNA可能有降解;
电泳后如果rRNA大小完整,而且28S rRNA和18SrRNA亮度接近2:1、mRNA分布均匀,则认为RNA。
新冠核酸检测是对病例确诊的标准之一,是病例早发现、早诊断、早隔离、早cure的关键,也是对传1染源隔离cure和密切接触者***观察的基础。
新冠感1染***后,首先会在呼吸道系统中进行繁殖, 因此可以通过检测痰液、鼻咽拭子中的病毒核酸判断***是否感1染病毒。在感1染一段时间以后(一般是7-10天),***会产生针对病毒的特异性抗1体,所以用免1疫学检测方法能够检测这些特异性抗1体,判断***是否感1染过病毒。这就是病毒的核酸检测与抗1体检测。与抗1体检测相比,核酸检测更加灵敏,也是实验室检测的“金标准”。
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